Descripción
Libro digital para leer en línea o en app móvil
Descripción:
La metodología utilizada y fundamentada en este
Manual de prácticas permite de manera sencilla, pero al
mismo tiempo científi ca y validable, que el alumno navegue
por experimentos y reacciones que sin duda alguna
lo llevarán a preguntarse de qué manera podrá aplicar estos conocimientos, obtenidos en un salón de laboratorio,
más tarde en su carrera profesional. De tal manera,
estudiantes de las carreras de medicina, odontología, nutrición,
enfermería, cultura física y del deporte, y técnicos
superiores en radiología e imagen, encontrarán en este
Manual de prácticas un recurso didáctico y aplicativo importante
para el desarrollo de un ejercicio intelectual que
encontrará su nicho de aplicabilidad no sólo durante su
estancia en nuestro Centro Universitario de Ciencias de
la Salud, sino tal vez más allá de su entorno.
Los autores de este manual de prácticas, pertenecientes
a la Academia de Bioquímica, han hecho un esfuerzo
honesto y auténtico para que nuestros alumnos de
Bioquímica “aprendan a no temerle” más al proceso de
aprendizaje de la Bioquímica. Que aprendan a entender
que los procesos metabólicos, y que las reacciones interiorizadas
en cada célula de nuestro cuerpo, son más luminosas
y fáciles de entender de lo que aparentan.
Tabla de contenidos:
Front Matter
Colaboradores
Acerca de los autores
Prólogo
Presentación del manual
Guía del estudiante
Diagrama de flujo para la elaboración del caso integrador
Normas de seguridad en el laboratorio
Acciones a tomar en caso de accidente
Recomendaciones para tener éxito en las prácticas
Práctica 1: Normas de bioseguridad y manejo de muestras biológicas, material, equipo y procedimientos
Normas de bioseguridad general
Medidas generales de protección
Lavado de manos
Método del lavado de manos
Medidas de seguridad para el manejo de muestras biológicas
Introducción
Equipo de protección
Limpieza del área y el material de trabajo
Obtención y manejo de muestras biológicas
Introducción
Aspectos éticos
Toma de sangre
Composición de la sangre
Suero y plasma
Obtención de sangre
Figura 1-1.
Anticoagulantes
Toma de muestra de orina
Varones
Mujeres
Niños
Medidas a seguir en caso de exposición a líquidos biológicos
Material, equipo y procedimientos
Introducción
Figura 1-2.
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Centrifugación
Fundamento
Centrífuga
Figura 1-3.
Espectrofotometría
Espectrofotómetro
Cuadro 1-1. Características del espectro UV y la luz visible.
Figura 1-4.
Bioimpedanciometría
Fundamento
Figura 1-5.
Actividades de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Bibliografía
Práctica 2: Agua y soluciones
Introducción
Agua
Soluciones homogéneas
Figura 2-1.
Cuadro 2-1. Procedimiento para calcular el peso molecular.
Propiedades de las soluciones
Propiedades constitutivas.
Propiedades aditivas.
Propiedades coligativas.
Diluciones
Objetivo general
Materiales y equipo
Soluciones y reactivos
Desarrollo experimental
Experimento 1
Manejo de concentraciones por espectrofotometría
Fundamento
Figura 2-2.
Procedimiento
Cuadro 2-2. Diluciones de fenolftaleína y su concentración.
Cuadro 2-3. DO esperada para una concentración determinada de fenolftaleína.
Actividades de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Preparación de reactivos
Bibliografía
Práctica 3: pH y amortiguadores
Introducción
Agua
Figura 3-1.
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Desarrollo experimental
Experimento 1
Medición del pH con tiras reactivas
Fundamento
Procedimiento
Cuadro 3-1. Resultados de la medición de pH de distintas soluciones.
Experimento 2
Sistemas amortiguadores
Fundamento
Desarrollo
Cuadro 3-2. Resultados obtenidos para el pH de diferentes soluciones, antes y después de la exposición a un ácido y a una base.
Experimento 3
Capacidad antiácida del hidróxido de aluminio y magnesio y del subsalicilato de bismuto
Fundamento
Procedimiento
Cuadro 3-3. Resultados obtenidos para el pH de hidróxido de aluminio y magnesio (Melox), subsalicilato de bismuto (Peptobismol) y agua, antes y después de exponerlos a una base y a un ácido.
Experimento 4
Curva de titulación del ácido fosfórico (H3PO4)
Fundamento
Potenciómetro
Figura 3-2.
Procedimiento
Actividades de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Preparación de reactivos
Reactivo de Yamada:
Bibliografía
Práctica 4: Aminoácidos y proteínas
Introducción
Métodos de separación de aminoácidos y proteínas
Objetivo general
Objetivo específico
Material
Desarrollo experimental
Experimento 1
Prueba de la ninhidrina
Fundamento
Figura 4-1.
Reacción:
Procedimiento
Cuadro 4-1. Organización de los tubos de reacción y su contenido.
Resultados esperados
Resultados obtenidos
Experimento 2
Prueba de Biuret
Fundamento
Figura 4-2.
Reacción
Material
Procedimiento
Cuadro 4-2. Organización de los tubos de reacción y su contenido.
Resultados esperados
Resultados obtenidos
Experimento 3
Determinación de las proteínas totales del suero y la relación entre albúmina y globulina (A:G)
Fundamento
Materiales
Procedimientos
Determinación de proteínas totales
Cuadro 4-3. Organización de los tubos de reacción y su contenido.
Cuadro 4-4. Resultados obtenidos para absorbancia y concentración de proteínas totales.
Cálculos
Determinación de albúmina
Cuadro 4-5. Organización de los tubos de reacción y su contenido.
Cuadro 4-6. Resultados de absorbancia y concentración de albúmina.
Cálculos
Valores normales de referencia
Experimento 4
Separación de aminoácidos por cromatografía en capa fina
Fundamento
Procedimiento
Discusión
Conclusiones
Actividades de aprendizaje
Preparación de reactivos
Bibliografía
Práctica 5: Regulación no específica de la actividad enzimática
Introducción
Catalasa
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Soluciones y reactivos
Desarrollo experimental
Preparación de la solución de catalasa
Fundamento
Reacciones
Desarrollo
Experimento 1
Efecto de la concentración de la enzima
Cuadro 5-1. Organización y contenido de cada uno de los matraces para el experimento 1.
Experimento 2
Efecto de la concentración de sustrato
Cuadro 5-2. Organización y contenido de cada uno de los matraces para el experimento 2.
Experimento 3
Efecto del tiempo sobre la reacción
Cuadro 5-3. Organización y contenido de cada uno de los matraces para el experimento 3.
Experimento 4
Efecto de la temperatura sobre la velocidad de la reacción
Cuadro 5-4. Organización y contenido de cada uno de los matraces para el experimento 4.
Experimento 5
Efecto del pH sobre la velocidad de la reacción
Cuadro 5-5. Organización y contenido de cada uno de los matraces para el experimento 5.
Discusión
Conclusiones
Actividades de aprendizaje
Preparación de reactivos
Bibliografía
Práctica 6: Metabolismo de carbohidratos
Introducción
Definición de carbohidrato
Clasificación de los carbohidratos
Funciones de los carbohidratos
Carbohidratos de la dieta
Regulación de la glucemia e importancia biológica
Categorías de la glucemia en ayuno
Hemoglobina glucosilada
Resistencia a la insulina
Evaluación antropométrica
Cuadro 6-1. Medidas antropométricas y su aplicación en la práctica clínica.
Evaluación de la presión arterial
Cuadro 6-2. Categorías de la presión arterial normal y de la hipertensión.
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Soluciones y reactivos
Desarrollo experimental
Procedimiento general (figura 6-1)
Figura 6-1.
A) Mediciones antropométricas
Figura 6-2.
B) Medición de la presión arterial
Técnica práctica para la toma de presión arterial
Figura 6-3.
Figura 6-4.
C) Extracción y procesamiento de muestras biológicas
D) Determinación de la glucemia en ayuno y posprandial
Fundamento
Procedimiento
Cuadro 6-3. Organización y contenido de los tubos para medición de glucosa.
Cuadro 6-4. Resultados de glucemia en ayuno y posprandial.
E) Determinación de la glucosa sanguínea capilar utilizando tiras reactivas
Fundamento
Procedimiento
Discusión
Conclusiones
Actividades de aprendizaje
Cuadro 6-5. Evaluación de factores de riesgo para diabetes en el entorno familiar del estudiante.
Cuadro 6-6. Calificación de riesgo para el desarrollo de diabetes mellitus tipo 2.
Cuadro 6-7. Indicadores de control metabólico.
Actividad complementaria
Preparación de reactivos
Cuadro 6-8. Composición de reactivos.
Bibliografía
Práctica 7: Metabolismo de lípidos
Introducción
Definición
Funciones
Importancia de la interacción de los lípidos con el agua
Metabolismo de los lípidos
Consecuencias del exceso de grasa corporal
Cuadro 7-1. Definición del síndrome metabólico, de acuerdo con los criterios del ATP III.*
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Desarrollo experimental
Procedimiento general
Experimento 1
MEDIDAS ANTROPOMÉTRICAS
A) Clasificación del peso corporal de acuerdo con el IMC.
Cuadro 7-2. Clasificación del peso de acuerdo al IMC.*
B) Clasificación del riesgo cardiovascular, de acuerdo con el ICC.
Cuadro 7-3. Clasificación del riesgo cardiovascular de acuerdo con el ICC.
C) Medición del porcentaje de grasa corporal mediante bioimpedancia eléctrica.
Procedimiento
D) Clasificación del porcentaje de grasa de acuerdo con el género.
Cuadro 7-4. Porcentaje de grasa corporal normal de acuerdo con el género.
Actividades de aprendizaje
Experimento 2
INDICADORES BIOQUÍMICOS
A) Determinación cuantitativa del colesterol sérico.
Significado clínico
Metodología
Fundamento
Procedimiento
Cuadro 7-5. Organización de los tubos y su contenido para determinación de colesterol.
Cuadro 7-6. Resultados de absorbancia y concentración de colesterol para cada muestra.
Actividades de aprendizaje
B) Determinación de la concentración sérica de triacilgliceroles (TG).
Significado clínico
Metodología
Fundamento
Procedimiento
Cuadro 7-7. Organización de los tubos y su contenido para determinación de TG.
Cuadro 7-8. Resultados de absorbancia para cada muestra.
Actividades de aprendizaje
C) Determinación cuantitativa del HDL-c sérico.
Significado clínico
Metodología
Fundamento
Reactivos
Procedimiento
Precipitación
Cuadro 7-9. Organización de los tubos y su contenido para determinación de HDL-c.
Cuadro 7-10. Resultados de absorbancia para cada muestra y concentración de HDL.
Valores de referencia
Actividades de aprendizaje
D) Cálculo del índice TG/HDL.
Valores de referencia
Actividades de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Bibliografía
Práctica 8: Metabolismo de compuestos nitrogenados
Introducción
Balance nitrogenado
Urea
Ácido úrico
Bilirrubina
Creatinina
Figura 8-1.
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Desarrollo experimental
Experimento 1
Determinación de urea por color
Fundamento
Muestra
Procedimiento
Cuadro 8-1. Organización y contenido de los tubos para determinar concentración de urea.
Valores de referencia
Experimento 2
Determinación de ácido úrico uricasa/peroxidasa
Fundamento
Muestra
Procedimiento
Cuadro 8-2. Organización y contenido de los tubos para determinar concentración de ácido úrico.
Valores de referencia
Experimento 3
Identificación de metabolitos en orina con tira reactiva
Fundamento
Muestra
Procedimiento
Actividades de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Bibliografía
Práctica 9: Extracción de DNA de células vegetales
Introducción
Objetivo general
Objetivos específicos
Materiales y equipo
Soluciones y reactivos
Desarrollo experimental
Experimento 1
Extracción del DNA
Fundamento
Obtención de DNA de germen de trigo
Actividad de aprendizaje
Experimento 2
Identificación de la desoxirribosa
Fundamento
Procedimiento
Actividad de aprendizaje
Discusión
Conclusiones
Preparación de reactivos
Bibliografía
Back Matter
Apéndice 1: Definición de prefijos, unidades y constantes físicas
Prefijos de uso frecuente
Constantes físicas
Apéndice 2: Constantes biológicas
Bibliografía
Apéndice 3: Determinación del gasto energético diario (GED)
Metabolismo basal (MB)
Acción dinámica específica de los alimentos (ADE)
Termogénesis por la actividad física (AF)
Fórmula de Harris Benedict para determinar el gasto energético diario
Cuadro A3-1. Calorías aportadas por cada gramo de proteínas, lípidos y carbohidratos.
Cuadro A3-2. Grupos de alimentos, equivalentes y composición promedio de nutrimentos.
Cuadro A3-3. Grupos de alimentos y raciones recomendadas.
Bibliografía
Apéndice 4: Historia clínica
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